外周血原位PD-L1表达检测技术,让免疫治疗更精准
    2021-02-19

截至目前,美国食品和药物管理局(FDA)已批准6种抗PD-1/L1抗用于多种晚期恶性肿瘤的治疗。包括纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、特瑞普利单抗和信迪利单4款抗PD-1抗体在国内上市2018年,Keytruda销售额达到71.7亿元,Opdivo销售额达到67.4 亿元,二者均进入全球Top10药物单品。施贵宝最早把PD-1药物O药推进临床K药借助组织学PD-L1高表达这一生物标记物率先杀入单药一线肺癌市场,成功弯道超车,并成功写入NCCN临床指南。但是,并不是所有的癌症患者都适用于这种免疫疗法,研究表明仅有20%左右的患者能够获益。

        如何确定自己是不是能获益的那个呢?学术界已经研究出众多的预测疗效的生物标志物,如:PD-L1表达、MSI检测、dMMR检测、TMB检测等。这些生物标记物可以通过取得活体肿瘤组织(或者是手术后的蜡块、切片)进行基因检测,一份全基因检测报告会给您指出PD-L1MSITMB的检测结果,并给出是否适合免疫治疗的建议。

u PD-L1:免疫组化检测蛋白表达情况(需要肿瘤组织切片)

uMSI:免疫组化检测4个蛋白表达情况(MMR检测位点:MLH1MSH2MSH6PMS2)或者二代测序检测基因突变(检测位点:BAT-25BAT-26NR-21NR-24Mono-27

uTMB:二代测序检测

以上几个生物标记物的检测都需要足量的肿瘤组织,否则,检测结果不敢保证!

 

如果患者手术时间比较久肿瘤组织失去检测价值,或者肿瘤组织无法切出足够的切片,或者是患者失去手术治疗机会又无法进行穿刺取得肿瘤组织,这时候,患者该如何评估PD-1免疫治疗的有效性呢?

        近期,德国汉堡大学的Klaus Pantel教授在《Cancers》上发表研究,确认了非小细胞肺癌(NSCLC)患者循环肿瘤细胞(CTC)上的PD-L1表达对PD-1/PD-L1抑制剂反应的重要性。

        该研究共收集了Hamburg-Eppendorf医学中心和Grosshansdorf LungenClinic127例样本(20159月至20182月)

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CTCs图像(A)CTC-PD-L1阴性细胞(B)CTC-PD-L1阳性细胞(C)CTC-PD-L1阴性细胞和CTC-PD-L1阳性细胞

 

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检测CTC的PD-L1表达状态

        研究发现,与组织学不同,高达93%的患者的CTC上都有PD-L1的表达,其中47%14/30)的患者的CTC上全部都表达PD-L1+47%14/30)的患者同时存在CTC-PD-L1+CTC-PD-L1-,只有6%2/30)的患者只存在CTC全部为PD-L1阴性(图这说明CTC-PD-L1+普遍存在NSCLC患者中

        本研究的重大突破是发现了CTC上的PD-L1动态变化对PD-1/PD-L1药物疗效的辅助诊断。CTC总数进行分析:在临床获益组中89%8/9)的患者在接受治疗后,CTC总数减少或无变化(6/9减少;2/9不变;1/9增加)。然而,2例出现耐药的患者的CTC总数均增加。同时该研究发现,在5例最终疾病进展的患者(3evasive 耐药和2例初期耐药)中,后期CTC总数较前期升高(P=0.003)。对CTC-PD-L1+数目进行分析临床获益组8例患者,相比PD-1 / PD-L1治疗前,5/8的患者CTC-PD-L1+数量减少,3/8无变化。同时分析发现,在5例最终疾病进展的患者(3evasive耐药和2例初期耐药)CTC-PD-L1+数量全部增加!(P=0.001)。该研究很好的证明了CTC-PD-L1+具有很好的PD-1/PD-L1抑制剂原发耐药性的预测能力。

 

肿瘤监测新手段:CytoBot 2000® 独家的原位PD-L1检测体系已经建立

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创新技术—原位PD-L1检测技术源于英国剑桥大学:

1. 外周血4 mL,通过万通道微流控芯片(芯片表面结合EpCAM抗体),自动化操作系统会利用微流控芯片物理筛选和EpCAM免疫抗体双富集系统捕获CTC,通过免疫荧光染色方法对捕获的CTC进行鉴定。

2.免疫荧光染色DAPI+/CK+/CD45-/PD-L1+细胞指认为PD-L1阳性CTC

3.   以上所述 CTC EpCAM抗体捕获是目前唯一一个通过美国 FDA 和中国 CFDA  CTC 富集方法,结合微流控芯片物理筛选,提升了CTC富集的灵敏度和特异性。

 

        基于CytoBot 2000®CTC PD-L1检测体系,只需要抽取4ml外周血,就能检测出PD-L1的表达水平,评估免疫治疗效果,指导用药选择。

        想要获得CytoBot 2000 CTC PD-L1原位表达检测,可致电汇先医药或关注官方公众号。

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